尊龙凯时人生就博推出的猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）旨在帮助养殖业主快速检测猪血清中的猪瘟病毒抗体。本文将详细介绍该试剂盒的使用说明，包括产品信息、原理、储存条件、样品准备及检验方法等内容。

产品信息

【产品名称】
通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：TestKit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

【包装规格】
96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟是一种由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的高度接触性、出血性和致死性传染病，特征包括高热、微血管壁变性及广泛出血、坏死等。本试剂盒用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，也可用于评价猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理

本试剂盒包含预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂，采用酶联免疫法（ELISA）检测猪血清或血浆样本中的猪瘟病毒抗体。实验过程中，样品中的抗体将与酶标板上的抗原结合，通过后续洗涤和反应步骤，形成可测定的产物，最终通过酶标仪在450nm波长下读数以判断样品中是否含有猪瘟病毒抗体。

储存及有效期

请将本试剂盒在2～8℃条件下保存，有效期为12个月。开封后的包被板应在2～8℃环境中避光保存，避免潮湿，使用期限为2个月。

适用仪器

适用仪器包括可检测450nm和630nm波长的酶标仪、37℃恒温设备及可调微量移液器。

样品准备

1. 动物全血按常规方法制备血清，要求清亮、无溶血及污染。样品可在2～8℃保存一周，长期保存应置于-20℃。
2. 将待检血清用样品稀释液按40倍稀释（如5μl血清加入195μl稀释液中），阴性和阳性对照不需稀释。
3. 使用浓缩洗涤液前应恢复至室温，稀释成工作洗涤液。

检验方法

1. 把试剂盒在室温下放置30分钟，至常温。
2. 取所需酶标板条，设置阴性和阳性对照各2孔，未使用的板条应密封保存。
3. 在阴、阳性对照孔中加入各100μl对照液，样品孔中加入100μl稀释样品。
4. 充分混匀，覆盖盖板膜，在37℃避光反应30分钟。
5. 清洗孔内液体，加入350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次。
6. 加入酶标记物100μl，继续在37℃下避光反应30分钟，之后洗涤。
7. 加入底物液A和B各50μl，盖好膜，再次置于37℃避光反应10分钟。
8. 加入终止液50μl，混匀后在450nm（可用630nm作为参考波长）测定吸光值。

参考值

在正常实验条件下，阴性对照的平均OD值应≤0.3，阳性对照的平均OD值应≥0.6。

检验结果的判定

1. 样品OD值为ODS；
2. 计算SP值：SP值 = (ODS - ODNC) / (ODPC - ODNC)；
3. 若SP值≥0.2，则结果为阳性；SP值＜0.2，结果为阴性。本实验结果为阴性时，建议补打相应疫苗。

试验方法的局限性

本试验仅作为对猪血清及血浆中猪瘟病毒抗体的定性检测，依据SP值可粗略评估抗体水平强度。

注意事项

1. 实验时需佩戴手套、穿工作服，严格执行消毒隔离制度，所有实验废弃物应按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，避免皮肤和衣物接触，如不慎接触，请立即用大量自来水冲洗。
3. 酶标板从冷藏状态取出后需恢复至室温再开封，未使用完的板条应放入干燥剂密封保存。
4. 濃缩洗涤液在低温下易结晶，使用前需恢复至室温。
5. 洗涤时各孔应加满液体，确保洗净酶标板。
6. 检测样品需保持新鲜。
7. 实验结果的判定必须依赖酶标仪的读数。
8. 不同批号的试剂组分不得混用。